Diagnóstico bacteriológico de Escherichia coli en tracto urinario

Urocultivo Un urocultivo es un examen de laboratorio que se utiliza para analizar la presencia de bacterias en la orina, se realiza principalmente cuando existen infecciones del tracto urinario para confirmar el diagnostico de cistitis, pielonefritis o litiasis.  Figura 1. Procedimiento para realizar un urocultivo.  Etapa pre-analítica Durante el desarrollo de esta etapa es necesario capturar los datos del paciente:  edad, género, factores predisponentes, síntomas, antecedentes de ITU, tratamiento actual o previo con antibióticos.  Esta etapa incluye además las recomendaciones previas a la toma de muestra especificada en la diferencia entre hombres y mujeres.  Etapa analítica Procesamiento de la muestra: orina  Se debe conocer como fue tomada la muestra y de que tipo se trata: chorro medio, punción suprapúbica, sonda (punción, sonda nueva). Examen directo  Este examen tiene dos etapas:  Examen macroscópico: olor, color, aspecto, pH, densidad.                                Figura 2 .

Tipo de muestra y recomendaciones Para realizar un urocultivo para la búsqueda de Escherichia coli es necesaria una muestra de orina. Algunas recomendaciones previas a la toma de la muestra son el correcto lavado de manos y del área genital.  En el caso de mujeres  se debe higienizar la zona genital con agua y jabón, de adelante hacia atrás, secarse con toalla limpia, se deben colocar un tapón vaginal (torunda de gasa o algodón) y se recomienda orinar separando los labios mayores.  Figura 1. Recolección de muestra en mujeres En el caso de los hombres se debe retraer el prepucio e higienizar el glande y surco balano prepucial con agua y jabón, evitando el uso de antisépticos.  Figura 2. Recolección de muestra en hombres

La tinción de Gram  permite observar la morfología microscópica característica, para esto se debe realizar un frotis a partir de una muestra de orina previamente recolectada. Para realizar el frotis se  toma una gota (con pipeta Pasteur) o una asada de orina, se coloca sobre una lámina portaobjeto.  Una vez que se realiza el frotis, se debe dejar secar para fijarlo al calor y posteriormente realizar la tinción de Gram para observarlo al microscopio con un objetivo de inmersión (100X) y determinar la morfología microscópica de la muestra. Escherichia coli   coloreado con Gram (figura 1) se observa como bacilos Gramnegativos. Figura 1. Tinción de Gram de E. coli Referencias consultadas Velasco, J., Araque, M. D. C., Araujo, E., Longa, A., Nieves, B., Ramírez, A. C., ... & Velazco, E. (2011). Manual práctico de bacteriología clínica. Recuperado el 12 de octubre de 2022 de  http://bdigital2.ula.ve:8080/xmlui/handle/654321/7750   Rodríguez-Angeles, G. (2002). Principales características

Para diferenciar la verdadera bacteriuria de una contaminación. Existen varios métodos para determinar la cantidad de microorganismos.  • Método del asa calibrada: Es un método práctico, sencillo y económico, que consiste en sembrar la orina sin centrifugar con un asa calibrada a 0.001 ml (3mm de diámetro) o 0,01 ml (4mm de diámetro).  Para los medios de cultivo se debe considerarse la recuperación de la mayoría de los patógenos, con el menor costo posible:  Agar sangre (AS):  E. coli en AS Agar CLED:  E. Coli en agar CLED Medio selectivo diferencial como MK o EMB:  E. Coli en Agar MK E. Coli en Agar EMB Procedimiento: Mezclar cuidadosamente la orina restante.  Insertar el asa estéril verticalmente en la muestra y luego diseminarla sobre la superficie de la placa desde el centro, formando una línea y posteriormente hacer estrías sobre la placa cruzando la línea del inóculo varias veces.  Incubar las placas durante 18–24 horas a 37 ºC en aerobiosis y el AS en microaerofilia. En cas

Para determinar si la muestra es idónea y es no contaminación es necesario contar el número de colonias y multiplicar por el factor 1000 o 100, de acuerdo a la capacidad del asa utilizada, para determinar las unidades formadoras de colonia por mililitro de orina (UFC/ml). Generalmente un recuento de 10.000 o menos colonias por ml de orina indica contaminación y un recuento de 100.000 o más, indica infección. Cuando se obtienen valores intermedios, el examen debe ser repetido, ya que existen factores como, la obstrucción uretral, diuresis, infecciones crónicas e infecciones por cocos grampositivos.  Fuente Bibliográfica:  Velasco, J., Araque, M. D. C., Araujo, E., Longa, A., Nieves, B., Ramírez, A. C. & Velazco, E. (2011). Manual práctico de bacteriología clínica.

Después de las infecciones respiratorias, las infecciones del tracto urinario (ITU) son las más frecuentes en la comunidad en general y en el ámbito hospitalario Por su epidemiología este tipo de infecciones se dividen en adquiridas en la comunidad o asociadas al cuidado de la salud. La s ITU han representado cerca de siete millones de consultas médicas ambulatorias y alrededor de un millón de hospitalizaciones anuales ( ( Medina-Polo y cols., 2015) . I nfecciones adquiridas en la comunidad: infección que se origina en un individuo por su adquisición en la población la cual frecuentemente requiere de ingreso hospitalario.  Infecciones asociadas al cuidado hospitalario: son aquellas infecciones que se adquieren en un hospital por un paciente ingresado por una razón diferente a esa infección (Miñanaa  & Pellicera, 2011).   Figura 1 . Microorganismos involucrados en ITU por infecciones adquiridas en la comunidad  Las ITU se hacen presentes en todos los grupos etarios, durante la inf

Las pruebas bioquímicas permiten determinar las características metabólicas de las bacterias de objeto de identificación. Algunas son rápidas, ya que evalúan la presencia de una enzima preformada y su lectura varía entre unos segundos hasta unas pocas horas. Otras pruebas requieren para su lectura el crecimiento del microorganismo con una incubación previa de 18 a 48 horas. En este caso, luego de un urocultivo para la identificación de dicha bacteria, generalmente debe ir acompañado de estas pruebas confirmatorias, como lo son las siguientes, de importancia para el dx.   1. TSI: Es fermentadora de lactosa, glucosa y sacarosa.  2. LIA:Negativo  3. MIO: Es móvil por lo tanto se observa turbidez en el medio  4. Citrato: Negativo  5. Urea: Negativo Fig 1. Identificación de E. Coli en pruebas bioquímicas. REFERENCIAS. -Gónzalez, M.J. (2013). Caracterización fenotípica de cepas de Escherichia coli uropatógena (UPEC) en pacientes pediátricos y sus perfiles de resistencia a aminoglucósidos,

     El antibiograma es un método de estudio in vitro del comportamiento de los antibióticos frente a los agentes infecciosos. Con los resultados obtenidos en el mismo se clasificaron las bacterias en sensibles, moderadamente sensibles (intermedio) y resistentes a un determinado antibiótico. El método de disco difusión es un método cualitativo que permite la clasificación del microorganismo en sensible o resistente. (Gónzalez, 2013)         Se encontró resistencia menor del 18,0 % para la cefalexina, gentamicina, kanamicina, ciprofloxacina y la nitrofurantoina. Los antibióticos betalactámicos (ampicillin y amoxicilina) y macrólidos (azitromicina) mostraron resistencia de 61,6, 64,6 y 54,5 %, respectivamente. La resistencia del cotrimoxazol y ácido nalidíxico osciló entre 25,0 al 28,6 %. Fue alta la sensibilidad de de E. coli a la nitrofurantoína (92,9 %). (Gónzalez, 2013) Fig 1. Antibiograma para E. coli.         La E. coli mostró baja resistencia para la cefalexina, la gentamicina,

  Para evaluar la resistencia a los antibióticos,  Guajardo-Lara, C. E., González-Martínez, P. M., & Ayala-Gaytán, J. J. en el 2009 .  realizaron una investigación. Se basaron el 652 urocultivos donde se aisló E. coli  con cuentas mayores a 100,000 UFC/mL. Usaron un sistema de MicroScan como apoyo, donde evaluaron la resistencia a amikacina, amoxicilina/clavulanato, ampicilina, cefazolina, ceftriaxona, cefuroxima, ciprofloxacino, gentamicina, nitrofurantoína y trimetoprim/sulfametoxazol. El estudio se comparó con resultados de dos clínicas de la ciudad de Monterrey, Nuevo León, el Hospital San José-Tec de Monterrey y Clínica Nova. Dentro de los resultados se encontró que incidian en una resistencia a la ampicilina (con un  67.2%),  trimetoprim/sulfametoxazol (59.2%) y cefazolina (con un 35.6%). Guajardo-Lara, C. E., González-Martínez, P. M., & Ayala-Gaytán, J. J. (2009). . El uso de un tratamiento empírico antes de que se puedan obtener los resultados de un urocultivo permite a